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T4 DNA Ligase




貨號:D7008

規格:200,000U

交貨周期:現貨

運雜費: 登錄后可查看運雜費

DeepBio得分:5567.2
DeepBio得分 是基于文獻引用次數,影響因子,文獻新近度等因素計算的客觀產品評級,得分越高表明該產品經過越可靠的實驗驗證,質量可信度越高

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產品說明書


產品說明書 D7008 T4 DNA Ligase.pdf

產品編號 產品名稱 產品包裝 產品價格
D7008 T4 DNA Ligase 200,000U 176.00元

      T4 DNA Ligase即T4 DNA連接酶,可以催化粘端或平端雙鏈DNA或RNA的5'-P末端和3'-OH末端之間以磷酸二酯鍵結合,該催化反應需ATP作為輔助因子。同時T4 DNA 連接酶可以修補雙鏈DNA、雙鏈RNA或DNA/RNA雜合物上的單鏈缺刻(single-strand nicks)。
      用途:T4 DNA Ligase常用于DNA片段和載體、linker或adaptor等的連接。也可以用于缺刻修復及Ligase介導的RNA檢測。
      來源:本T4 DNA Ligase由大腸桿菌表達,表達基因的來源為T4嗜菌體。
      活性定義:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1個Weiss unit,以Weiss unit計,本產品共1000單位。
      T4 DNA Ligase連接產物轉化感受態后涂板LB平板的效果參考圖1。

      圖1. 本T4 DNA Ligase的連接產物轉化感受態細菌后涂板獲得的LB平板效果圖。A. 雙酶切后的載體自連過夜;B. 雙酶切后的載體與待插入片段過夜連接。
      純度:不含DNA內切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,滿足常規連接反應要求。
      酶儲存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
      10× Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
      失活或抑制:65℃孵育10分鐘可以導致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl濃度大于200mM時強烈抑制T4 DNA Ligase。 
包裝清單:

產品編號 產品名稱 包裝
D7008-1 T4 DNA Ligase (1000U/μl) 20, 000U
D7008-2 10X Ligation Buffer 1.5ml
說明書 1份

保存條件:
      -20℃保存。
注意事項:
      對于普通的轉化大腸桿菌的操作,不必對連接產物進行純化,連接產物可以直接用于轉化。但用電轉方法轉化大腸桿菌時,通常宜先用DNA純化試劑盒或酚氯仿抽提方法等純化DNA,然后再進行電轉。
      需進行平端連接或快速連接時,推薦使用碧云天的快速DNA連接試劑盒(D7002/D7003)。T4 DNA Ligase可以進行平端連接,但效率較低。
      普通連接反應不必進行凝膠電泳觀察。如果需要對于連接產物進行凝膠電泳觀察,推薦先在65℃孵育10分鐘使
T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA結合導致的條帶位置遷移(band shift)。
      本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。